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大鼠補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒實驗原理及試劑盒成份

發(fā)布時間:2018-10-22   點擊次數(shù):1886次

大鼠補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠補體蛋白3(C3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠補體蛋白3(C3)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

大鼠補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒

英文名稱:Rat C3 ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:25 μg/mL – 800 μg/mL
低檢測限:1.0 μg/mL
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)

試劑盒組成

 

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8孔×12條

8孔×6條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

操作步驟

  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.   樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。